龙芪柔肝胶囊中黄芪甲苷的含量测定

药物鉴定　龙芪柔肝胶囊中黄芪甲苷的含量测定　２００６年第ｌ５卷第ｌ６期　张明生，周亚军　（河南省信阳市中心医院，河南信阳４６４０００）　摘要：目的测定龙芪柔肝胶囊中黄芪甲苷的含量。方法双波长反射式锯齿扫描，测定波长为４００ｎｍ，参比波长为６００ｌｉａ，线性参数Ｓｘ＝３，ｒ　狭缝０．４ｍｍ　ｘ０．４ｍｍ。结果平均回收率为９９．４１％，ＲＳＤ＝１．１７％。结论该方法适用于龙芪柔肝胶囊中黄芪甲苷的含量测定。　关键词：黄芪甲苷；龙芪柔肝胶囊；薄层扫描法；含量测定　中图分类号：Ｒ２０４．１；Ｒ２８６．０　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６—４９３１（２００６）１６—００２６—０１　Ｃｏｎｔｅｎｔ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　Ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ　ＩＶ　ｉｎ　Ｌｏｎｇｑｉｒｏｕｇａｎ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ　，Ｉｇ　Ｍｉｎｇｓｈｅｎｇ，Ｚｈｏｕ　ｒａｊｕｎ　ｒＸｉｎｙａｎｇ　Ｃｉｔｙ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔｌ　ｏａｆＨｅｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｘｉｎｙａｎｇ，Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ　４６４０００）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯＭｅ￣ｉｉｖｅ　Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ　ＩＶ　ｉｎ　Ｌｏｎｇｑｉｒｏｕｇａｎ　ｃａｐｓｕｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｓｃａｎｎｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｄｕａｌ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｒｅｌｆｅｃｔｉｏｎ　ｚｉｇｚａｇ　ｓｃａｎｎｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ａｔ　４００　ｎｍ，ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ａｔ　６００　ｎｍ，ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｐａｒａｍｅｔｅｒ　Ｓｘ＝３　ａｎｄ　ｓｌｉｔ　ｓｉｚｅ　ａｔ　０．４　ｍｍ×　０．４　ｍｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　９９．４１％（ＲＳＤ＝１．１７％）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｔｒａｇａｌｏｓｉａｄｅ　ＩＶ　ｉｎ　Ｌｏｎｇｑｉｒｏｕｇａｎ　ｃａｐｓｕｌｅｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ　ＩＶ；Ｌｏｎｇｑｉｒｏｕｇａｎ　ｃａｐｓｕｌｅｓ；ＴＬＣ—ｓｃａｎｎｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ；ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　龙芪柔肝胶囊是由黄芪、党参、当归、黄精、地龙等药物组成，　具有益气养阴、活血柔肝的功效，用于治疗慢性病毒性肝炎、肝纤　维化、肝硬化等，疗效显著。为有效控制本制剂的质量，笔者以方中　主药黄芪所含有效成分黄芪甲苷为指标，采用薄层扫描法进行了　含量测定，报道如下。　１仪器与试药　参比波长为６００　ｎｍ，线性参数Ｓｘ＝３，狭缝０．４ｍｍ　Ｘ０．４ｍｍ。　２．３方法学考察　标准曲线绘制：分别吸取黄芪甲苷对照品溶液４，６，８，１０，１２　ｖ．Ｌ，　点于同一块薄层板上，按上述条件进行展开、显色和扫描，用最小　二乘法对点样量Ｗ（　）和吸收峰面积Ａ进行回归计算，得直线方　程Ａ＝１．６７２Ｗ＋１０．２７８，ｒ＝０．９９９　８。结果表明，黄芪甲苷点样量　在２．８～８．４　ｇ范围内与峰面积线性关系良好。　稳定性考察：吸取对照品溶液和供试品溶液各适量，按上述方　ＣＳ一９３０１型薄层扫描仪、钨灯（日本岛津）；高效硅胶Ｇ薄层　板（山东烟台市化学工业研究所）；ＧＤＵ一１０Ｃ型数据处理仪（日本　岛津）；微量进样器（上海医用激光仪器厂）；ＡＲ２１４０型电子分析天　平（美国奥豪斯公司）。黄芪药材（河南省药材公司，批号为　０４０６１０）；黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号为　０７８１—２０００８）；氯仿、甲醇、硫酸等试剂均为分析纯。　２方法与结果　２．１　溶液制备　法展开、显色后，立即进行扫描，此后每隔３０　ｍｉｎ测定１次。结果表　明，黄芪甲苷峰面积值在２　ｈ内均无任何显著变化。　加样回收试验：精密称取龙芪柔肝胶囊内容物５０　ｇ，分别准确　加入不同量的对照品，按供试品溶液制备方法操作，依法扫描测　定，根据测得量和加入量计算回收率，结果见表１。　表１黄芪甲苷加样回收试验结果（ｎ＝６）　取龙芪柔肝胶囊内容物５０　ｇ，精密称定，加甲醇１００　ｍＬ，超声处　理２０ｍｉｎ，滤过。滤液蒸干，用５％氢氧化钠溶液１０ｍＬ分次溶解残　渣，并转移至分液漏斗中，用正丁醇（１Ｏ，１０，５，５　ｍＥ）分别提取４次。　提取液加氧化镁６．Ｏ０　ｇ，搅匀，蒸干，研细，置索氏提取器内，加甲　醇７０　ｍＬ回流提取３　ｈ，滤过，滤液蒸干，残渣精密加入甲醇２　ｍＬ，　超声助溶，静置，取上清液作为供试品溶液。将处方中除黄芪外的　其他药材按龙芪柔肝胶囊制备方法制成阴性对照品，取内容物５０异，　按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。精密称取黄芪甲苷　对照品，用甲醇溶解，并定容成浓度为１　ｍｇ／ｍＬ的对照品溶液。　２．２薄层条件确定　层析条件：吸取黄芪甲苷对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶　一２．４样品含量测定　分别精密吸取对照品溶液ｌ０　及供试品溶液ｌ０　，点于同　块薄层板上，按上述条件进行展开、显色、封板、扫描，测定吸收　峰面积积分值，计算黄芪甲苷的含量，结果批号为０４０８１５，４１００２７，　０５０１１３的３批样品中黄芪甲苷含量分别为０．５９１　０，０．５３４　４，　０．５７１　５ｍｇ／ｇ。　液各ｌ０　Ｌ，点于同一块于１０５℃活化１　ｈ的高　效硅胶Ｇ薄层板上，以氯仿一甲醇一水（６５：　３５：ｌＯ）１ＯＯＣ以下放置过夜的下层液为展开剂，　展开，取出，喷以ｌＯ％硫酸液４ｍＬ，于１０５℃烘　约１０　ｍｉｎ。结果黄芪甲苷斑点在日光下显棕褐　色，在紫外灯（３６５　ｎｍ）下显橙黄色（见图１　ｏ　扫描条件：采用双波长反射式锯齿法”Ｉ，　３　讨论　由于本制剂中成分较为复杂，曾用一般方法提取黄芪甲苷，结　果色谱拖尾严重，干扰测定。经反复试验，采用文中方法处理，取得了　较满意的效果。结果表明，本方法可用于龙芪柔肝胶囊的质量控制。　参考文献：　１．对照品溶液　２．供试品溶液　３、阴性对照品溶液　将上述薄层板上棕褐色斑点分别在３７０～　５２０　ｎｍ处进行扫描。结果在４００　ｎｍ波长处有　［１】王小明，赵满琼，叶向阳．养正合剂中黄芪甲苷含量的测定［Ｊ】．中国　现代应用药学杂志，２００２，１９（１１）：１４４．　共性特征吸收峰，故扫描条件定为　＝４００ｎｍ，　・图ｌ薄层色谱图　（收稿日期：２００６—０４—２１；修回日期：２００６—０６—２４）　２６・