饲料原料中农药残留及有毒有害物质的快速检测

维普资讯 http://www.cqvip.com 安徽农业科学。Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＡｎｈｕｉ姆ｉ．Ｓｃｉ．２００６，３４（５】：９１５，９２１　责任编辑金琼琼责任校对金琼琼　饲料原料中农药残留及有毒有害物质的快速检测　丁在亮，陶小平，刘发全（安徽省兽药饲料监察所，安徽合肥２３００２２）　摘要由于农药使用不当，饲料原料在生产过程中会存在农药残留；环境污染及其他原因也会使这些原料残留有毒有害物质；一些原料　在加工过程中会衍生有害物质。使用快速检测方法能准确测定原料中这些有毒有害物质的含量，从而能进行有效控制。　关键词饲料原料；快速检验方法　中图分类号￥８１６　文献标识码Ａ　文章编号０５１７—６６ｌｌ（２００６）０５—０９１５—０１　饲料中的农药残留及有毒有害物质主要来源于饲料原　料，其次是加工、储存等过程中的污染。如果能快速、准确地　酶。乙酰化酯酶很不稳定，极易水解，其半衰期约为０．Ｉ　ｎ峙。　乙酰化酯酶水解后又释放出酶分子，从而使酶复活，再循环　测定出原料中有毒有害物质的含量或者通过快速测定手段　判定原料中有毒有害物的水平，那么就可以通过控制原料的　使用来降低饲料中有毒有害物质的含量，使饲料符合安全　要求。　ｌ植物性饲料原料　饲料中常用的植物性原料主要有：豆粕、棉籽粕、菜籽　粕、花生饼（粕）、玉米、麸皮、次粉、统糠等。它们中的有毒有　害物质的来源比较复杂：有由外源性污染带来的有毒有害成　分；还有其本身固有的天然有毒有害成分。外源性污染主要　有：为防治作物病虫害而使用农药引起的农药残留，如滴滴　涕（ＤＤＴ）、六六六、呋喃丹等高毒高残留的有机氯农药，甲胺　磷、甲拌磷（３９１１）、甲基对硫磷（甲基１６０５）、对硫磷（１６ｏ￣）等　有机磷农药；因环境污染导致的重金属超标等有毒有害物质　的蓄积，如汞、铅、镉、铬、钴、砷等；收获后储存不当而产生的　黄曲霉菌、沙门氏菌的污染等。饲料中固有的天然有毒有害　成分种类繁多，大多是植物体内的代谢产物，对动物可产生　各种毒害作用，这样的有毒有害成分主要有以下几类：甙类　（菜籽粕中的硫葡萄糖甙、高粱中的单宁）、有毒蛋白和肽（豆　类中的蛋白酶抑制素、抗原蛋白）、酚类（棉酚）、有机酸（植　酸）、萜类、生物碱（菜籽粕中的芥子碱）、亚硝酸盐、氟等。　在作物生长过程中使用的低毒低残留的农药在植物性　饲料原料中几乎没有残留。但是由于市场监管不力，仍然有　人使用高毒甚至是剧毒且残留量高的农药，对饲料安全构成　严重威胁。这些农药的活性成分都是典型的小分子化合物，　多使用气相色谱法（Ｇ　）、液相色谱法（ＨＰｔＣ）来分析。这些　方法准确可靠，但是周期长、投资大、成本高、要求严，不符合　生产实践的需要。为了适应大量饲料原料的常规检钡０，需要　开发快速检测法，即使用快速检测法对大量样本进行初步筛　选，再对初筛中具有阳性结果的样本进行实验室验证。样本　预处理技术也将得到改进。最后是使用选择性更好的检测　手段，如ＧＬＣ、Ｉ－１ＰＬＥ、ＧＣ　ＭＳ、ＨＰＬＣ—ＭＳ等进行测定。　１．１有机磷农药残留的快速初筛检测法　１．１．１胆碱酯酶或酯酶抑制法。国内外已开发出多种方法　测定食品中有机磷与氨基甲酸酯农药的残留。其原理是乙　酰胆碱酯酶和乙酰胆碱作用时，首先形成一个酶底物的络合　物，接着乙酰胆碱上的酰基转移到酶分子上，形成乙酰化酯　作者简介丁在亮（１９７１一），男，安徽淮北人，兽医师，从事兽药、饲料质　量的检测检测工作。　收稿日期２００５．１１．１５　利用。这种技术完全可以用来测定植物性饲料原料中的有　机磷与氨基甲酸酯农药的残留。乙酰胆碱酸酶用于农药残　留速测综合指标优于其他酶系，且能够专一性地被有机磷和　氨基甲酸酯类药剂抑制，可通过检测被检样品是否使乙酰胆　碱酯酶活性发生变化来快速准确测出样品中农药残留。该　检测法已有成型的仪器。　１．１．２免疫分析法。是一种将抗体抗原反应与现代测试手　段相结合的微量分析法，具有高灵敏度和高效能等优点，仅　需很少的仪器设备，是初筛及测定致癌物和一些剧毒农药的　好方法。　ｌ，１．３传感器技术。以上２种方法都可以使用传感器技术，　利用酶或抗体作为获得高灵敏度的基本物质，在特殊的膜或　类似表面上进行反应，通过测定ｐＨ值、电导或传导的变化等　可输出信息。最适用于现场测试。但材料的寿命、其他物质　的干扰、感应重现性等都是需要解决的问题。　１．２有机氯农药残留的快速检测法在有机氯农药的检测　方法中，传统的ＧＬＣ检测方法已经有了很大的改进。这主要　归功于样品前处理技术的改进，快速溶剂萃取（ａＳＥ）技术的　应用使原来需要数１０　ｈ的处理时间，现在缩短为１５　ｍｉｎ！而　且溶剂少（萃取ｉ０　ｇ样品仅用１５　ＩＴｌｌ溶剂）、萃取效率高。再　加上上机测量时间（１个样品大约需要２ｏ一３０　ｍｉｎ），１个样品　的检测在１　ｈ内可以结束。如果要检测大批量的样品，单个　样品的平均检测时间更短。　Ｉ．３重金属的检测现在大多采用的是原子吸收分光光度　法和原子荧光法。如果采用微波消解法进行样品前处理，单　独的１个样品在３　ｈ内就可以完成检测（传统方法对样品前　处理一般需要２０ｈ）。如果要检测大批量的样品，单个样品的　平均检测时间更短；如果样品量多于１Ｏ个，平均每个样品的　检测时间不到１　ｈ。　１．４菌类的检测霉菌、沙门氏菌、黄曲霉毒素的检测已经　有了快速检测的国标法：试剂条和试剂盒法。适合于大批量　样品的快速筛选。　１．５固有的天然有毒有害成分的检测植物中固有的天然　有毒有害成分大多是植物在生长过程中体内的代谢产物，是　植物本身的有机成分，在不同植物的不同部位中含量相对稳　定，所以不同原料中含有的有毒有害物的种类不同，而且含　量相对稳定。这些成分种类繁多，检测十分复杂，目前还没　有快速的检验方法。只要查出前人的统计数据，然后根据自　（下转第９２１页）　维普资讯 http://www.cqvip.com ３４卷５期　李慧等茯苓多糖发酵工艺的优化　９２１　米粉中含有维生素、纤维素、核苷酸等多种营养成分，有利于　６％、ＫＪ－Ｉ２ＰＯ４　０．１％、ＭｇＳ０４　７Ｈ２０　０．０５％、（ＮＨ４）２ＳＯ４　０．２％、ｐＨ　菌丝体的生长和多糖的积累与分泌。　值５．６，菌丝多糖含量可达１４．１８　ｇ／Ｌ。　２．２不同氮源对菌丝体多糖含量的影响　由表２可知，用　表４　（　）正交实验结果　ｇ／Ｌ　有机氮源进行茯苓多糖发酵，菌丝体多糖产量明显高于无机　实验号　Ａ　Ｂ　Ｃ　多糖　总和　氮源。可见，菌丝体对有机氮源的利用能力优于无机氮源。　５．５　５．Ｏ　５．２５　１５．７５　７－８　７．５　８．ｏｏ　２３．３ｏ　表１　不同碳源对菌丝体多糖含量的影响　８．４　９．５　９，８３　２７．７３　２．５５　３．Ｏ　３．８ｏ　９．３５　８．８ｏ　８．Ｏ　９．３ｏ　２６．１Ｏ　７．７１　８．Ｏ　８．１０　２３馏１　９　８３　１Ｏ．３２　１Ｏ．２６　３０．４ｌ　１２．２　ｌ１．２ｌ　ｌ】．１８　３４．９５　ｌ３．３　１３．５８　１３．４０　４０．２８　２９．００　２８．４０　２６．９５　２４．４０　２９．０５　２３．８５　表２　不同氦源对菌丝体多糖含量的影响　２９．６５　２５　４５　２７．１５　５．２Ｏ　２．２Ｏ　Ｏ．８ｏ　３结论　（１）在茯苓多糖发酵培养基中，无机碳源与有机碳源和　２　３　４　５　６　７　８　９墨　无机氮源与有机氮源配合使用，不仅有利于菌丝体的大量生　长与繁殖，而且可以诱导、促进多糖的产生和积累；单独使用　无机碳源不利于茯苓菌丝体的生长与繁殖。　２．３最佳发酵条件的确定选择Ｌｏ（３　）正交实验优化发酵　（２）ｐＨ值对茯苓菌丝体的生长和多糖的积累有明显的　条件，具体见表３、４。　影响，该实验结果表明最适ｐＨ值为５，０　５．６。　（３）正交优化实验确定的茯苓多糖发酵最佳培养基为：　表３　（　）正交实验因素及水平　葡萄糖４％、玉米粉４％、蛋白胨０．４％、麸皮６％、ＫＨＥＰＯ４　０．１％、ＭｇＳ０４。７Ｈ２０　０．０５％、（ＮＨ４）２ＳＯ４　０．２％、ｐＨ值５．６。利　用此培养基在１Ｏ　Ｌ发酵罐上进行５批发酵，茯苓多糖最高产　量达１６．１２　Ｌ，平均产量为１４，１　ｇ／Ｌ。　参考文献　［１］王强．枸杞中多糖的含量测定［Ｊ］．中草药，１９９１，２２（２）：６７．　由表４可见，ＲＡ＞ＲＢ＞Ｒｃ。说明３因素对菌丝体多糖　［２］ＢＯＨＮ　ＪＯＨＮ　Ａ，ＢＥＭ　ＭＩＩＪＥＲ　ＪＡＭＥＳ　Ｎ．（１－３）．（．Ｇｔｕｅａｎｓ　ａｓ　Ｉ】ｉ‘】ｌ　含量的影响顺序是碳源＞氮源＞ｐＨ值。菌丝体多糖积累的　ｑＨｌｓｅ　ｒｍｄｉｉｆｅｃｓ：ａ　ｒｅｖｉｅｗ　ｏｆ　ｓｔｒｕａｃｔｉｖｉｔｙ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ［Ｊ］．Ｃ｛　Ⅺｈｙｃ　ｅ　Ｐｏｌｙｍ￣，１９９５，２８：３—１４．　最佳培养基为：葡萄糖４％、玉米粉４％、蛋白胨０．４％、麸皮　－—－卜ｎ。－卜“—－＋－“—卜　。－卜”。－卜ｎ＋・・＋”＋”＋”＋”＋・－＋・・＋・・＋・－＋・・　ｎ－－卜”—－＋－“－－卜－・－－卜ｎ－－卜　－－卜・－－－卜・－＋一－－卜－・－－卜－・－－卜・－＋一＋・・＋－・＋・・＋・－＋－－＋“＋・・＋・・＋“＋　＋　＋“＋一＋“＋・　（上接第９１５页）　鱼粉、肉骨粉（骨粉）、乳清粉、贝壳粉。此类饲料原料中的　己使用的原料情况酌情验证一下，掌握各自的数据然后在　有毒有害物质来源多样：有的是其本身固有的，如动物性蛋　设计配方时适当注意就行了。　白饲料中含有组胺和抗硫胺素等；有的是在生产过程中被　２矿物质饲料原料　污染的，如骨粉中含有重金属等；有的是加工过程中产生的　矿物质饲料原料中的有毒有害物质主要有铅、氟、砷、　毒素，如高温加工的鱼粉能产生导致鸡胃糜烂的胃溃素；还　铬、镉等金属和非金属化合物。它们是矿物质中天然存在　有储存过程中产生的毒素，如因酸败、霉变、腐烂而滋生的　的，因产地不同，所含有的有毒有害物质的种类和含量有所　致病菌、寄生虫及细菌毒素等。　不同。此类物质有很强的毒性，长期摄入含铅超标的食品　这类原料中的重金属、霉菌、沙门氏菌等的检测方法与　会造成慢性铅中毒，小孩表现为身体及智力发育缓慢，成人　前面使用的方法一致；霉变、腐烂，及是否滋生了寄生虫等　则表现为骨骼变脆易骨折等；摄入含氟超标的食品会使人　可以通过简单的目测来断定；原料是否产生了酸败，可通过　的血钙降低，骨质增生，椎间隙变窄等。　闻饲料的气味来判断。如果饲料有油酸味，即通常说的“哈　这些重金属的快速定量检测可采用原子吸收分光光度　味”，即可初步判定饲料已经发生了酸败。如果发生了酸　法和原子荧光法。在对饲料用无机矿物质原料中的重金属　败，就要通过检测酸败程度来判定此原料是否可用，具体的　监测方法上，样品前处理很简单，一般是用酸溶解后直接测　方法是采用氢氧化钾滴定法测定酸价。　定，速度很快。　参考文献　３动物源饲料原料　［１］杨风，陈可容，周安国，等．动物营养学［Ｍ］．北京：农业出版社，１９９１．　动物源饲料主要有鱼粉、肉粉、肉骨粉（骨粉）、羽毛粉、　［２］季之华，王随元，杨振海，等．饲料工业标准汇编（２ｏｏ２）［ＭＩ．北京：中国　标准出版社，２Ｏ０２．　乳清粉、动物内脏、蚕蛹、生鸡蛋清及贝类、甲壳类动物等，　［３］钱传范．农药残留分析技术的新动向［ｃ］／／￣ｔ京农药学会．北京农药学　它们都是很好的蛋白质饲料。在饲料工业中应用最多的是　会１９９９年年会专辑．１９９９．